在细胞生物学研究中,微管就像细胞内的 “高速公路”,负责物质运输、细胞分裂等关键任务。但想在活细胞里看清它们的动态,曾是个麻烦事 —— 传统方法要么需要基因改造(比如表达荧光蛋白融合的微管蛋白),要么染料毒性大,刚染好细胞就 “罢工” 了。
而 SPY555-tubulin 的出现,相当于给研究者递了一台 “微管专用高清摄像机”,直接解决了这些痛点。
一、为什么说它是活细胞微管的 “理想染色剂”?
作为 SPY™染料家族的一员,SPY555-tubulin 的核心优势可以总结为三个 “无”:
- 无毒性:对细胞代谢几乎无干扰,长时间成像也不会影响微管的正常功能(比如细胞分裂时的纺锤体动态)。
- 无需基因操作:不用构建质粒、转染细胞,直接孵育就能特异性结合微管,省去了繁琐的分子克隆步骤,尤其适合难以转染的细胞(如原代细胞、神经细胞)。
- 无背景干扰:只在与微管结合后才发出强荧光,游离状态下几乎不发光,成像时微管轮廓清晰得像 “用荧光笔描过”。
二、光谱特性:和常用染料 “百搭”,显微镜不用 “换装备”
- 激发 / 发射波长:555nm 激发,580nm 发射,和四甲基罗丹明(TMR)的光谱几乎重合,实验室里的 TMR 或 Cy3 滤光片组直接能用,不用额外买新设备。
- 多色成像友好:能和 SPY505(绿色)、SPY650(远红)、SiR(近红外)以及 GFP 等荧光蛋白 “和平共处”,一次实验就能同时观察微管与其他细胞器(如线粒体、细胞膜)的相互作用。
- 超分辨率兼容:荧光亮度高、光稳定性强,搭配 SIM(结构光)或 STED 显微镜,能拍出纳米级的微管细节(STED 成像时用 660nm 或 775nm 激光 depletion 即可)。
三、实验操作有多简单?像 “泡咖啡” 一样方便
- 配液:冻干粉末用 DMSO 溶解,配成 1000× 母液(50μL 规格刚好够约 100 次实验,想省着用还能减少染色体积或浓度)。
- 染色:把母液稀释到细胞培养基里(终浓度 1×),37℃孵育几分钟,微管就会被特异性标记,甚至不用洗去多余染料(背景极低)。
- 成像:宽场、共聚焦显微镜都能拍,活细胞能连续观察几小时,连微管的动态组装 / 解聚过程都能清晰记录。
四、哪些研究场景特别适合它?
- 细胞分裂研究:实时追踪纺锤体微管的组装与分离,观察抗癌药物(如紫杉醇)对微管的影响。
- 神经细胞动态:标记神经元轴突中的微管,研究其生长锥的延伸与回缩。
- 多色共定位:比如搭配 SPY505-actin(标记 actin),同时观察微管与细胞骨架的协同运动。
技术参数速览
参数 | 详情 |
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激发 / 发射波长 | 555 nm / 580 nm(匹配 TMR/Cy3 滤光片) |
荧光寿命 | 2.4 ns(适合荧光寿命成像分析) |
适用样本 | 仅限活细胞(固定细胞不适用) |
储存条件 | -20℃避光保存,DMSO 母液可分装冻存 |
超分辨率适配 | STED depletion 波长 660 nm 或 775 nm |
简单说,SPY555-tubulin 就像为活细胞微管量身定做的 “荧光追踪器”—— 无需复杂操作,就能让微管的一举一动在显微镜下无所遁形。对于想直观研究微管动态的研究者来说,它可能是目前最省心的选择之一。
你在实验中用过哪些顺手的细胞骨架染色剂?欢迎在评论区分享经验~