常见问题

可以。探针在室温下一般可稳定保存数天，但具体稳定性很大程度上取决于探针种类及所用溶剂。建议所有探针及其配制好的溶液统一保存在 -20°C。

有。在超过一定浓度阈值后，这两类探针都可能对细胞增殖产生影响，并改变肌动蛋白或微管的动态行为。不过，与其母体药物相比，这些探针的毒性要低得多。

Spirochrome 的建议使用条件为：

SiR 探针：推荐使用 100 nM

SPY 探针：推荐将 DMSO 储备液按 1:1000 稀释后使用

正常。在 DMSO 中，探针主要以无色的螺环（spiro）形式存在，因此溶液颜色可能从无色到轻微显色不等，具体取决于探针类型。这种现象不会影响探针的染色效率。

部分可以。

SiR 和 SPY 系列中的 actin、DNA 和 lysosome 探针可用于 PFA（多聚甲醛）固定细胞。

但用于微管的 SiR 和 SPY 探针不适用于固定细胞；如果先对活细胞完成标记，再进行固定，这些微管探针也无法经受固定步骤。

通常不建议。在 STORM 成像通常所需的超高光强条件下，活细胞往往会出现由激发光引起的光毒性，因此不适合用于活细胞 STORM。

但对于一些所需激发功率更低的单分子定位显微技术（SMLM），则可能更合适。

以下仅为已知验证有效的细胞系、组织或生物样本；如果某一细胞、组织或物种未列出，并不代表 SiR 探针一定不能染色。已列出的适用对象包括：

人（Homo sapiens）

U2OS、成纤维细胞、HeLa、HUVEC、MCF-10A、HCT-116、A549、红细胞。

小鼠（Mus musculus）

C2C12、IA32、骨骼肌、原代心肌细胞、原代卵母细胞。

大鼠（Rattus norvegicus）

原代海马神经元、原代皮层神经元、NRK。

非洲绿猴（Cercopithecus aethiops）

COS-7。

叙利亚仓鼠（Mesocricetus auratus）

BHK。

果蝇（Drosophila melanogaster）

Notum epithelium、S2。

负鼠（Didelphis marsupialis）

OK-cells。

金鱼（Carassius auratus）

视网膜双极细胞。

斑马鱼（Danio rerio）

视网膜双极细胞。

可以。这些探针能够对 3D 生长环境中的细胞进行染色，例如细胞球（spheroids）和类器官（organoids）。

CF260 = 0.116

CF280 = 0.147