HAK-Actin™
HAK-Actin™ 是面向膨胀显微技术的一款新型工具，旨在解决该技术中肌动蛋白难以稳定染色这一长期存在的难题。HAK-Actin™ 兼容基于 U-ExM 的实验方案，包括 cryo-ExM 和 iU-ExM。其设计支持膨胀后标记，可在不依赖物种特异性肌动蛋白抗体的前提下，实现信号最大化、简化实验流程，并允许灵活选择荧光标记基团。
产品描述
HAK-Actin™ 是一种泛物种的膨胀显微探针，适用于基于 U-ExM 实验方案的肌动蛋白可视化。HAK-Actin™ 可特异性结合 F-肌动蛋白，其设计使其能够锚定于凝胶之中，并在膨胀步骤后反映原始肌动蛋白结构。HAK-Actin™ 含有 HA 标签表位，因此可在膨胀后通过抗 HA 抗体与物种特异性二抗进行检测。该探针采用单一实验方案，操作简便，同时二抗上的荧光标记可自由选择，具有良好的灵活性。此外，一抗与二抗联用可增强荧光信号放大，从而克服因膨胀导致的荧光信号体积稀释问题。
每管 HAK-Actin™ 可供制备 100 个凝胶*。
HAK-Actin™ 的工作原理是什么？
HAK-Actin™ 探针包含三个关键要素：
1、HA 标签表位序列，即使在膨胀后仍能被抗 HA 抗体强效且特异性识别。
2、一种泛物种、高特异性、高亲和力的 F-肌动蛋白配体，仅与聚合状态的肌动蛋白（F-肌动蛋白）实现强效结合；
3、一个锚定基团，可与丙烯酰胺特异性反应，将 HAK-Actin™ 共价连接至膨胀凝胶；
Figure 1. After fixation (chemical or cryo) and permeabilization, the sample to be expanded is treated with HAK-actin™. The probe’s actin ligand uniformly labels F-actin within the cells. The sample is then subjected to U-ExM (or iU-ExM) protocol. During the protocol, HAK-actin™ is covalently bound within the expansion gel and expands faithfully with the sample. The final immunolabeling step using a primary anti-HA and a fluorescently labeled secondary antibody boosts the fluorescent signal and reveals the expanded actin structure with high contrast.
HAK-Actin™ 主要优势
膨胀后免疫染色，信号更强。 HA 标签支持使用标准抗 HA 抗体进行膨胀后标记，荧光强度较直接标记探针提升约 4 倍，且二抗可搭配任意荧光染料，选择灵活。
凝胶内锚定稳固，保留率高。 四个赖氨酸有助于与 U-ExM 聚合物高效交联，实现明亮、特异的肌动蛋白染色，背景噪声低。
兼容多种实验方案。 适用于标准 U-ExM、cryo-ExM 及 iU-ExM（最高约 16 倍膨胀），并可与微管等其他靶标进行多重标记。
适用模型广泛。 在人类细胞（HeLa、U2OS）、神经元（生长锥、树突棘）、血小板、小鼠视网膜（睫状突处信号更清晰）以及多种微生物真核生物（包括抗肌动蛋白抗体或鬼笔环肽可能失效的鱼孢虫细胞壁物种）中，均可实现均匀的肌动蛋白标记。
突破 ExM 关键限制。 采用后标记策略，避免了预标记方法中荧光信号稀释及颜色选择受限的问题，无需物种特异性抗体或肌动蛋白基因标记，简化了实验流程，保障结果可重复。
无需转染或外源表达。 HAK-Actin™ 不要求基因表达带标签的肌动蛋白单体，直接标记内源性肌动蛋白，操作更便捷。
参考文献
Manuscript describing the HAK-actin™: Mercey, O., et al: HAK-actin, U-ExM-compatible probe to image the actin cytoskeleton. BioRxiv, 2025.
U-ExM protocol article: https://doi.org/10.1016/bs.mcb.2020.05.006
iU-ExM protocol article: https://doi.org/10.1038/s41467-023-43582-8
Cryo-ExM protocol article: https://doi.org/10.1038/s41592-021-01356-4
*以上染色次数按每次实验使用 0.5 mL 染色液、探针终浓度为 1× 估算。若减少染色液体积或降低探针浓度，可进一步增加染色次数。
HAK-Actin™ 探针由 Spirochrome 在瑞士日内瓦大学独家许可下进行销售。HAK-Actin™ 为瑞士日内瓦大学的注册商标。
常见问题（FAQ）
1. HAK-Actin™ 主要用于什么实验？
HAK-Actin™ 主要用于膨胀显微技术中的 F-肌动蛋白可视化，适合 U-ExM、cryo-ExM 和 iU-ExM 相关实验。
2. HAK-Actin™ 是否支持膨胀后标记？
支持。该产品专门设计用于膨胀后标记，并通过 HA 标签体系实现后续免疫检测。
3. HAK-Actin™ 是否依赖物种特异性肌动蛋白抗体？
不依赖。该产品可在不依赖物种特异性肌动蛋白抗体的前提下实现肌动蛋白标记。
4. HAK-Actin™ 是否适合多重标记实验？
适合。该产品可与微管等其他靶标进行多重标记，且二抗荧光染料选择灵活。
5. 页面是否提供资料下载？
是。当前页面提供 HAK-Actin™ 的 datasheet 和 SDS 文件下载。
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